ناکارآمدی کارایی زیستی سن نواری چتریان Graphosoma lineatum در اثر کاهش جمعیت باکتری همزیست

عنوان دوره: اولین کنگره بین المللی حشره شناسی ایران

نعیمه کرمی پور؛ محمد مهرآبادی؛ یعقوب فتحی پور

همزیست‌های حشرات اغلب دارای عملکرد بیولوژیکی بسیار مهمی مانند تامین مواد غذایی ضروری در میزبان می‌باشند. تعداد زیادی از سن‌ها (Heteroptera) نیز به همزیست‌های موجود درکیسه‌های کاملا محصور موجود در اطراف بخش چهارم معده میانی خود وابسته بوده به طوری‌که حذف آزمایشگاهی این همزیست‌ها اثرات نامطلوبی بر نرخ رشد و نمو، تولیدمثل و طول عمر میزبان ایجاد می‌کند. در این پژوهش عملکرد باکتری‌های درون‌همزیست در سن‌نواری چتریان Graphosoma lineatum بررسی شد. با توجه به این‌که این همزیست‌ها به طور عمودی و از طریق آلودگی باکتریایی روی سطح تخم منتقل می‌شوند، به منظور حذف همزیست تعدادی از دسته‌های تخم ابتدا در اتانول 70 درصد به مدت 10 دقیقه و سپس در هیپوکلریت سدیم 10 درصد به مدت 15 ثانیه قرار گرفتند و در نهایت با اتانول 70 درصد شست و شو شدند. دسته‌های تخم مربوط به شاهد نیز با آب مقطر استریل تیمار شدند. پوره‌های تفریخ شده از این دسته‌های تخم در شرایط آزمایشگاهی و در دمای 1±27 درجه سلسیوس، رطوبت نسبی %5 ±60 و دوره نوری 16 ساعت روشنایی و 8 ساعت تاریکی پرورش داده شدند. استخراج DNA برای تایید حذف همزیست از پوره‌های سن پنج تیمار و کنترل انجام شد. بعد از یکسان‌سازی غلظتDNA ها، PCRبا پرایمر عمومی ژن حفاظت شده 16srRNAانجام شد. باندهای DNA مشاهده شده در حشرات ایجاد شده از تخم‌های تیمار ضعیف‌تر از باندهای مشاهده شده در حشرات شاهد بود. این موضوع کاهش جمعیت باکتری همزیست را در تخم‌های تیمار شده نسبت به شاهد مشخص می‌نماید. آنالیزهای جدول زندگی با استفاده از آزمون T انجام شد. نتایج تفاوت معنی‌داری را در اکثر پارامترهای زیست‌شناسی و باروری میان حشرات حاصل از تخم‌ها تیمار شده و شاهد نشان داد. براساس این نتایج طول دوره پیش از بلوغ به طور معنی‌داری در پوره‌های تفریخ شده از تخم‌های تیمار (54/0 ± 87/32روز) بیشتر از شاهد (50/1± 50/28 روز) بود. همچنین باروری، طول دوره زندگی و طول عمر افراد بالغ نیز به طور معنی-داری در تیمار (به ترتیب 92/41± 14/157، 85/5± 83/49 و 16/6±20/57) کمتر از شاهد (به ترتیب06/24 ± 44/309، 50/5 ± 63/89 و 83/2 ± 62/80) بود. بنابراین، احتمالا باکتری‌های درون‌همزیست نقش بیولوژیکی مهمی را در سن نواری چتریان ایفا می‌کنند. در مجموع این پژوهش ارتباط تنگاتنگ میزبان-همزیست را نشان می‌دهد به طوری‌که حضور باکتری باعث بهینه سازی رشد میزبان می‌شود. این برهمکنش میزبان- همزیست می‌تواند ناشی از تامین مواد غذایی همچون آمینواسیدهای ضروری و ویتامین‌ها برای میزبان توسط همزیست‌ باشد، که اثبات این موضوع نیازمند مطالعات‌ بیشتر است.

برهمکنش؛ جدول زندگی؛ انتقال عمودی